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離子對試劑及鹽類的使用和注意事項說明

點擊次數:1713次 更新時間:2022-03-25

   離子對試劑及鹽類是一類常用的實驗室試劑,將這類試劑加入到反相色譜流動相中可以增強離子樣品的保留。使用其可以改善疏水鍵合相表面的離子交換能力,可以在溫和的流動相pH條件下更好地控制酸性或堿性樣品的保留。

  通過試劑上的疏水部分(常見的有庚烷基,十二烷基)與色譜柱固定相發生作用而吸附在柱床上,使固定相具有了一定的離子交換能力,從而增強對帶相反電荷的分析物的保留。
 
  離子對試劑及鹽類的使用:
  加入離子對的目的
  加入與待測組分相反的離子,形成弱極性離子對,增強保留,改善峰形。
 
  加入離子對的情形
  反相HPLC中不保留或保留很差;
  化合物有強離子官能團:磺酸基、羧基、氨基、銨基等。
  注意:化合物在反相流動相體系中要有足夠的溶解度,能不用就不使用。使用的色譜柱專柱專用,不同離子對可以使用同一色譜柱。
 
  離子對試劑及鹽類的注意事項:
  ●試劑的用量:按當量計算,濃度至少比樣品濃度大4~5倍;
 
  ●磺酸類離子對不建議采用梯度洗脫;超過30%的有機相建議預混;
 
  ●有機相優先使用甲醇;建議使用進口試劑,特別是波長小于240nm時;使用容易出現鬼峰;
 
  ●溫度變化對離子對色譜的影響更大;
 
  ●離子對色譜中,pH對物質保留的影響正好與普通反相色譜相反;
 
  ●經驗性:加入烷基磺酸鈉,堿性物質保留時間增加;中性和酸性物質保留時間減小。
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